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世界熱訊:pcr退火溫度與引物tm值的關(guān)系-退火溫度與tm值的關(guān)系
2023-06-27 01:48:49來源: 互聯(lián)網(wǎng)


(資料圖片僅供參考)

1、1.一般來說,較低的退火溫度可以提高pcr反應(yīng)的敏感性但特異性較差;而較高的退火溫度則可以提高pcr的特異性但卻降低了擴(kuò)增效率。

2、通常引物與模板的退火溫度在45-55度。

3、2.優(yōu)化退火溫度最好的方法是設(shè)置一系列對(duì)照反應(yīng),即通過在低于計(jì)算出的引物Tm值2-10度的溫度范圍內(nèi),進(jìn)行退火的一系列平行反應(yīng)來確定最佳退火溫度。

4、也可以通過touch down pcr來設(shè)定退火溫度,得到最佳退火溫度。

本文到此分享完畢,希望對(duì)大家有所幫助。

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